發(fā)酵用pH值是微生物在一定環(huán)境條件下代謝活動(dòng)的綜合指標,是一項重要的發(fā)酵參數,對菌體的生長(cháng)和產(chǎn)品的積累有很大的影響。因此必須掌握發(fā)酵過(guò)程中PH的變化規律,以便對發(fā)酵過(guò)程進(jìn)行合理有效控制。
每一類(lèi)菌都有其最適的和能耐受的PH范圍。細菌和放線(xiàn)菌在6.5~7.5,酵母在4~5,霉菌在5~7。微生物生長(cháng)階段和產(chǎn)物合成階段的最適PH往往也不一樣,這不僅與菌種的特性有關(guān),也取決于產(chǎn)物的化學(xué)性質(zhì)。因此,為了更有效地控制生產(chǎn),必須充分了解微生物生長(cháng)和合成產(chǎn)物的最適PH。
選擇合適的發(fā)酵用pH的準則即是有利于菌的生長(cháng)和產(chǎn)物合成,以獲得較高的產(chǎn)量。以利福霉素為例,由于利福霉素分子中所有碳單位都是由葡萄糖衍生的,在生長(cháng)期葡萄糖利用情況對利福酶素B生產(chǎn)產(chǎn)生一定影響。
試驗證明,其最適PH在7.0~7.5范圍。當PH在7.0時(shí),平均得率系數達最大值,在利福酶素B發(fā)酵的各種參數中從經(jīng)濟角度考慮,平均得率系數最重要,故PH7.0是利福酶素B的最佳條件。
發(fā)酵過(guò)程中由于菌在一定溫度及通氣條件下對培養基中碳氮源等的利用,隨著(zhù)有機酸或氨基氮的積累,會(huì )使PH產(chǎn)生一定的變化.在適合菌生長(cháng)及合成產(chǎn)物的環(huán)境條件下,菌體本身具有一定調節PH的能力,但是當外界條件變化過(guò)于激烈,菌體就失去調節能力,培養液中的PH就會(huì )發(fā)生波動(dòng).引起發(fā)酵PH下降的因素有:
培養基中碳氮比例不當,碳源過(guò)多,特別是葡萄糖過(guò)量,或者中間補糖過(guò)多加之溶解氧的不足,致使有機酸大量積累而PH下降。
消沫劑加的過(guò)多生理酸性物質(zhì)的存在,氨被利用,PH下降.引起PH上升的因素有培養基中碳氮比例不當,氮源過(guò)多,氨基氮釋放使PH上升.生理堿性物質(zhì)存在中間補料中氨水或尿素等的堿性物質(zhì)加入過(guò)多使PH上升。
PH的變化會(huì )引起各種酶活力的改變,影響菌對基質(zhì)的利用速度和細胞的結構,以致影響菌體的生產(chǎn)和產(chǎn)物的合成.產(chǎn)黃青霉素細菌的細胞壁隨PH增大而減少,其菌絲的直徑在PH6.0時(shí)為2~3um,而PH7.4時(shí),菌體直徑為2~18um,呈大量膨脹酵母狀細胞,隨PH下降菌絲形態(tài)將會(huì )恢復正常。PH值還會(huì )影響菌體細胞膜電荷狀況,引起膜的滲透性變化,從而影響菌對營(yíng)養吸收和代謝產(chǎn)物形成等。
因此在了解發(fā)酵過(guò)程中各階段合理PH以后,需要進(jìn)一步設法控制PH在合適的范圍內。首先要在基礎培養基配方中考慮到維持PH的需要,然后通過(guò)中間補料來(lái)控制PH。如在青霉素發(fā)酵中,根據產(chǎn)菌代謝需要改變加糖速率來(lái)控制PH。
另外,也可通過(guò)中間補加氨水,尿素或硫酸銨,碳酸鈣來(lái)調節PH。如在某種抗生素發(fā)酵過(guò)程中,當發(fā)酵液中氨基氮較低時(shí)可通入氨水。
但如此PH過(guò)高,超過(guò)適合范圍,則可以用硫酸銨代替氨水降低PH,并補充氮源的不足。目前國內使用一些電極和控制器來(lái)監控和調節PH,這樣使得調控更加方便